1. Leve pequenos vertebrados frescos, como peixes, sapos, etc., de 10 a 20 cm de comprimento, para viver também.
2. Lavagem de material fixo limpa. Se for um peixe, você deve escalar primeiro e depois lavar. As amostras experimentais foram então colocadas em etanol a 95% e fixadas por 1 a 2 dias. Se o material tiver sido preservado com 5 a 10% de formaldeído líquido, enxágue com água limpa e mergulhe em etanol a 95%, para que fique totalmente fixo.
3. Descasque e descasque a pele do animal pequeno com um anatomista.
4. Desengordurar a amostra descascada amarrada à folha de vidro com uma corda, finalizando a postura, imersa em solução de cromo potássio a 3% por alguns dias, remova a superfície do material de partículas de sujeira e gordura. Amostra experimentalQuando a solução ficar turva, substitua o novo líquido até que a solução não esteja turva. Remova a amostra, lave-a com água limpa e depois mergulhe em etanol a 95% por cerca de uma semana.
5. Os estoques de amostras transparentes são transferidos para uma solução de hidróxido de potássio a 20%. Durante uma semana ou mais, os músculos são vistos em um estado translúcido, com os ossos aparecendo por dentro, ou seja, terminando a transparência.
6. Coloração A amostra transparente é imersa em corante vermelho de sissina a 0,01% por 2 a 3 dias até o osso ficar vermelho.
7. Desbotamento Primeiro, coloque a amostra em solução de hidróxido de potássio a 2% por 1 dia e depois transfira-a para o líquido desbotado por cerca de 10 dias; a amostra experimental para a cor do músculo desbota até o rosa pálido.
8. Branqueamento Com uma solução diluída de peróxido de hidrogênio, mergulhe até os músculos ficarem completamente transparentes e os ossos ficarem vermelho-púrpura.
9. Salvar Primeiro, use uma seringa para remover as bolhas na amostra e depois coloque glicerina pura para economizar.
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